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        動物源性檢測試劑的操作方法介紹

        發布時間:2021-09-01 點擊量:263
          動物源性檢測試劑適用于粗品動物源性原料的摻假檢測,運用配套的磁珠法試劑盒提取DNA,已提取的DNA為模板進行實時熒光PCR擴增,以實時定量檢測技術,采用單重PCR方法將所用試劑配置成預混合形式組建成實時熒光PCR(豬源和反芻源)DNA檢測試劑盒,其中一管是檢測樣本中豬基因的含量(FAM熒光) 另一管是檢測樣本中反芻源動物的基因的含量。
          用戶只需每孔加5ul的DNA樣品即可上機測試,大大提高了使用的便捷,同時減少了交叉污染的機率,避免整個試劑盒反復凍融,從而影響檢測效果。
          動物源性檢測試劑如何去操作呢?
          1、需要按試劑準備中描述的方法,配制好動物源性DNA檢測試劑盒各種組分的工作液。
          2、所有試劑和組分都先恢復到室溫,標準品、質控品和樣品,建議做復孔。
          3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
          4、設置標準品孔、樣本孔和空白孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,樣本孔加待測樣本50μL,空白孔不加。
          5、用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。
          6、除空白孔外,標準品孔和樣本孔,加入過氧化物酶標記的檢測抗體100μL。
          7、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
          8、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘。
          9、如此重復4次,若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高檢測的精度;洗板結束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應板。
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